采用双抗夹心联免疫吸附测定法(ELISA)实现极低含量的蛋白定量检测。先将捕获抗体偶联到磁珠上,磁珠直径2.7μm,结合了抗体的磁珠和目的蛋白结合,而不与目的分子结合的磁珠保持无标记物。洗涤磁珠去除非特异性结合的蛋白,加入酶反应底物,磁珠转移到Simoa光盘上,每个光盘有24个芯片,而单个芯片表面有216000个小孔,每个小孔的直径是4.2μm,落入一个磁珠,去除多余的磁珠并将荧光信号密封在小孔中。由于反应体系极小,比传统100μl的体系小了20亿倍,此时即使一个的目的蛋白分子催化底物可以产生足够的荧光分子被CCD成像系统进行数字化解读。
Simoa数字式单分子免疫阵列分析仪常见故障出现原因和解决措施:
1.真空压力不足:进行真空压力测试,若测试结果正常,可知是因真空传感器检测不到真空压力引起。该机的压力测试由两个传感器分别检测高、低压力,对有问题的传感器进行调整或清洗后,再次测试真空压力,压力正常后调节传感器螺丝使高、低压力指示在规定范围内。
2.压力表指示为零:进行真空压力测试,能听到泵的工作声音,但压力表指示为零。首先检查废液瓶所接的真空管,测试真空压力,判断该故障是否因漏气或压力表损坏引起。检查各管道的接口有无漏气,检查相关的四只电磁阀(在真空压力测试时,这四只电磁阀不工作,为关闭状态),对有问题的管道或电磁阀及时修复或者更换。
3.发光体错误:检查发光体表面发现有液体渗出,该故障分三步检查:检查废液探针、相关管路及清洗池是否有堵塞、漏液;检查加样电磁阀、排液电磁阀,电磁阀,有污物会引起进水或排水不畅;检查与废液探针管路相连接的碱泵清洗管路是否有漏气以及碱泵是否有裂缝。
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